Hvordan utføre seriefortynninger

Innhold

• stadier
• Metode 1 Utfør en enkel fortynning
• Metode 2 Beregn den endelige fortynningsfaktoren og konsentrasjonen

I kjemi består en fortynning av å redusere konsentrasjonen av en gitt løsning. En seriefortynning er ganske enkelt en gjentatt fortynning av en original løsning for raskt å forsterke fortynningsfaktoren. Denne typen fortynning utføres ofte under eksperimenter som krever sterkt fortynnede oppløsninger og høy nøyaktighet, for eksempel de som involverer konsentrasjonskurver i en loggskala eller de som gjør det mulig å beregne tettheten av bakterier i visse medier. De utføres ofte i biokjemi, mikrobiologi, farmakologi eller kjemi.

stadier

Metode 1 Utfør en enkel fortynning

1. 
   

   
   Bestem riktig fortynningsvæske (eller fortynningsmiddel). Valget av fortynningsmiddel er veldig viktig og avhenger av løsningen du vil fortynne. Fortynningsmidlet er ofte destillert vann, men det er ikke systematisk. Med en løsning som inneholder bakterier eller celler brukes således et kulturmedium i stedet. For seriefortynning brukes samme fortynningsmiddel i alle rør.
   • Hvis du er usikker på hvilket fortynningsmiddel du skal bruke, kan du få hjelp fra en kompetent person eller se på Internett etter hva folk må gjøre for en lignende opplevelse.

2. 
   

   
   Tilbered flere prøverør som inneholder 9 ml av en fortynningsvæske. Disse prøverørene vil bli brukt til å lage suksessive fortynninger. Prinsippet er enkelt, du vil ta en prøve av startløsningen og overføre den til neste rør, deretter ta en prøve av dette røret for å sette det i det neste osv.
   • Før du starter fortynningene, er det lurt å identifisere prøverørene på forhånd for å unngå forvirring senere.
   • I hvert rør vil du ha en konsentrasjon ti lavere enn i den forrige. Det første røret vil inneholde en fortynnet løsning i den tiende, den andre, den hundre, den tredje, den tusende og så videre. Bestem på forhånd antall fortynninger for å unngå å lage flere rør enn nødvendig og avfallsfortynningsmiddel unødvendig.

3. 
   

   
   
   
   Forbered et prøverør med morløsningen din. Ha minst 2 ml. Minste mengde lageroppløsning for seriefortynning er en milliliter. Tillat 2 ml for en mulig annen fortynning. Dette røret med morløsningen, du kan merke det som en "SM".
   • Før du starter en seriefortynning, bland startløsningen godt.

4. 
   

   
   Gjør den første fortynningen. Pipetter 1 ml av stamløsningen i prøverøret merket "SM" og overfør denne mengden til det merkede prøverøret. 1/10 som allerede inneholder 9 ml fortynningsvæske. Bland for å få en homogen løsning. I dette røret er det nå 10 ml løsning: 1 ml stamløsning og 9 ml fortynningsvæske. Denne nye løsningen er ti ganger mindre konsentrert enn den forrige.

5. 
   

   
   
   
   Utfør den andre fortynningen. I den andre seriefortynningen vil du trekke 1 ml av den merkede rørløsningen 1/10 så hell du den i røret 1/100 som allerede inneholder 9 ml fortynningsvæske. Røret 1/10 vil ha vært godt blandet før prøvetaking. Når overføringen er fullført, bland røret godt 1/100. Løsningen fra det markerte røret 1/10 er 10 ganger mer konsentrert enn det for det merkede røret 1/100.

6. 
   

   
   Gjenta denne manipulasjonen om nødvendig. Denne prosedyren kan gjentas så mange ganger som ønsket inntil ønsket fortynning er oppnådd. For et eksperiment som involverer konsentrasjonskurver, kan du dermed skaffe en serie løsninger med fortynninger til enheten, den tiende (1/10), den hundredelte (1/100) eller den tusendelte (1/1000).

Metode 2 Beregn den endelige fortynningsfaktoren og konsentrasjonen

1. 
   

   
   Beregn ratio den endelige fortynningen etter seriefortynning. Det totale fortynningsforholdet oppnås ved å multiplisere fortynningsfaktoren med seg selv så mange ganger som det er fortynninger. Matematisk er formelen som følger: D_t = D₁ x D₂ x D₃ x ... x D_nmed D_t som representerer den totale fortynningsfaktoren og D_n, forholdet mellom fortynningen.
   • Så la oss anta at du utfører en 1/10 fortynning av en væske 4 ganger på rad. Erstatt fortynningsfaktoren med verdien i formelen: D_t = 10 x 10 x 10 x 10 = 10.000
   • Den endelige fortynningsfaktoren til det fjerde røret i din seriefortynning er 1/10 000. Konsentrasjonen av løsningen av det siste røret er nå 10 000 ganger lavere enn den for den opprinnelige løsningen.

2. 
   

   
   Bestem konsentrasjonen av en løsning etter fortynning. For å finne den endelige konsentrasjonen av en løsning etter seriefortynning, må du vite startkonsentrasjonen. Formelen er da: C_endelige = C_initial/ Amed C_endelige som representerer den terminale konsentrasjonen av den fortynnede løsningen, C_initial, konsentrasjonen av stamløsningen og D, forholdet mellom fortynning bestemt på forhånd.
   • Så hvis du fortynner en celleoppløsning med en konsentrasjon på 1 000 000 celler per ml og fortynningsforholdet ditt ble satt til 1 000, hva vil da være den endelige konsentrasjonen av den fortynnede prøven?
   • Bruk formelen:
     • C_endelige = C_initial/ A
     • C_endelige = 1 000 000/1 000
     • C_endelige = 1000 celler / ml

3. 
   

   
   Vær oppmerksom på enhetene som brukes. Når du gjør beregningene dine, må du alltid sjekke at du bruker de samme enhetene. Så hvis du tar utgangspunkt i en konsentrasjon av celler per ml, vil det endelige resultatet også være i celler per ml. Hvis startkonsentrasjonen er i deler per million (ppm), vil den endelige konsentrasjonen være i deler per million.